Un recorrido por el casco histórico de Santa Fe puede comenzar por el Paseo de las dos culturas, el cual se halla ubicado en el Barrio Sur. Es importante mencionar que en este barrio comenzó el trazado de la actual Santa Fe, luego de su traslado en 1660 desde el primer emplazamiento en las cercanías de Cayastá. Es por lo tanto el sector más antiguo y tradicional de Santa Fe y aún se aprecian, confundidas con la edificación moderna, viejas casonas de la época colonial, llenas de historias, anidando recuerdos bajo sus descoloridas tejas, conservando aljibes, sauces llorones, jazmines y rejas en sus patios. Es el asiento de los poderes públicos como la Casa de Gobierno, el Palacio de Justicia, o la Legislatura, y de uno de los más pintorescos espacios verdes de la ciudad: el Parque Manuel Belgrano, con su gran lago y donde funciona el Balneario Municipal y el Club Náutico El Quillá. El sector este del barrio está determinado por la Avenida de Circunvalación, que lo separa del Riacho Santa Fe, a cuyas orillas se encuentra el Puerto.

Volviendo al Paseo de las Dos Culturas (3 de febrero y 25 de mayo), podemos decir que reúne 3 importantes museos y el Convento de San Francisco.

El Templo, Convento y Museo de San Francisco (San Martín y Amenábar), que constituye un importante exponente de la arquitectura religiosa del período colonial, y fue declarado Monumento Histórico Nacional en 1942. El museo encierra una valiosa colección de obras artísticas e históricas, destacándose en él la Sala de los Constituyentes de 1853, con figuras de cera de tamaño natural.

El Museo Histórico Provincial Brig. Gral. Estanislao López (3 de Febrero y San Martín), construido a fines del siglo XVII, en 1943 fue declarada sede del museo que expone tallas de imaginería religiosa, obras pictóricas, platería, porcelanas, muebles, y documentos históricos.

El Museo Etnográfico y Colonial Juan de Garay (25 de Mayo 1470), fue creado en 1940, y exhibe restos arqueológicos del primitivo asentamiento de la ciudad en Cayastá.
A pocos metros de aquí, sobresale la Casa de Gobierno (3 de Febrero 2649), construida a partir de 1911 en el predio que ocupara el Cabildo. Rodeando la Plaza 25 de Mayo también encontramos el Palacio de Tribunales, la Iglesia Nuestra Sra. De los Milagros, construida en 1700, y la Catedral Metropolitana, construcción que data de mediados del siglo XVIII. Continuando hacia el sur hallamos el Centro Cívico frente al lago del Parque General Belgrano; el Anfiteatro Juan de Garay, con capacidad para 2000 espectadores.

Todos estos puntos conforman uno de los principales y estratégicos nudos turísticos de la ciudad, en cuyas inmediaciones se encuentran además,
- la Legislatura Provincial (Gral López 3053), edificio que fue concluido en mayo de 1914, en el solar de la antigua Aduana;
- el Museo de Bellas Artes Rosa Galisteo de Rodríguez (4 de Enero 1510),
- la Estación de Ferrocarril Gral. Mitre, que data de 1891.
- La casa donde viviera el ilustre Gobernador de la Provincia, Brigadier General Estanislao López (Gral. López y 9 de Julio), construida en 1812 en el solar perteneciente a la orden de La Merced, fue declarada Monumento Histórico Nacional en 1942. Actualmente es la sede del Archivo General de la Provincia.
- La Casa de los Aldao (Buenos Aires 2845), data de fines del siglo XVII, plena época